培养基制备步骤口诀?
1.配料
配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)一按照配方称取各种药品(依次加入)一加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水调成糊状
加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加
热边搅拌以防止烧焦。
3.调 PH
用1N的盐酸或1N的 NaOH 把培养基调节到所要求的值。
4.过滤
滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去)
5.分装
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养,则100m培养基/250ml的三角瓶,最多不能超过150m培养基/250ml的。
(2)试管分装
培养基是什么意思?
培养基[péi yǎng jī]是供微生物、植物和动物组织生长的营养基质
培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等;根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质,易被污染或变质。配好后不宜久置,最好现配现用。
高中生物六种培养基?
培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
分类:
1.天然培养基
指一类利用动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。
2.组合培养基
又称为合成培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。
3.半组合培养基
指在液体培养基中加入少量凝固剂而配置成半固体状态的培养基
4.液体培养基
80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。
5.固体培养基
一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。
6.半固体培养基
指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。
培养基的种类有哪几种?
培养基的种类有:
1)基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,最常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。
(2)营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。
(3)鉴别培养基:利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。
(4)选择培养基:在培养基中加入抑制剂,去抑制标本中的杂菌生长,有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂,其中的胆盐能抑制革兰阳性菌,枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌,因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。
(5)特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。
什么是培养基?
培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项:
确认工作细胞库是否被污染:用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。
确认毒种工作种子批是否被污染:用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。
确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染:用细菌、真菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。
其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。
另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自独立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。
na是什么培养基?
NA培养基又称为营养琼脂培养基。
主要用于一般细菌的培养,转种,复壮等。
标准配方如下:
蛋白胨10.0g,牛肉粉3.0g,氯化钠5.0g,琼脂15.0g
将以上原料溶于1000毫升纯水中,以盐酸或氢氧化钠调整溶液PH为7.3,保存条件为25℃避光保存,有效期为180天。
在使用前,将培养基取出,在121℃高压灭菌15分钟后再进行使用。
菌落培养基怎么做?
培养基的制作常用马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基制作方法如下:
称取去皮、切片的马铃薯200克,置于锅中,加水 1 000毫升,煮至薯片软而不烂。用数层纱布过滤,取滤液。
向滤 液中加琼脂20克,继续煮沸至琼脂完全融化,加葡萄糖20克,补 水至1 000毫升。趁热分装于试管中,装至试管长度的1/4?1/5, 擦净管口,塞上棉塞,棉塞要松紧适中,不能出现缝隙。
121°C灭菌 30分钟。灭菌后,斜放试管,使培养基前端蔓延至试管长度1/2, 盖上纱布或灭菌的报纸(防冷凝水过多),待培养基凝固后,取3? 5支试管置于30°C培养3天,若无杂菌出现,表明灭菌彻底,可供 接种用。
珀丽康细胞培养基是什么?
细胞培养基是盐、碳水化合物、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素的复杂混合物。不同细胞系对这些成分的要求各不相同,因此产生了不同类型的培养基。碳水化合物主要以葡萄糖的形式提供。在某些情况下,用半乳糖代替葡萄糖以减少乳酸的积累,因为半乳糖的代谢速度较慢。其他碳源包括氨基酸(特别是L-谷氨酰胺)和丙酮酸。
除了提供营养物质,培养基还能够维持培养系统中的pH值和渗透压。pH值由1个或多个缓冲系统维持,常见的有:CO/碳酸氢钠、磷酸盐和HEPES。通常情况下,会在培养基中加入酚红作为pH值指示剂,监测pH值的变化。
1、珀丽康细包培养基在生产工序上具有严格的管理措施,产品质量可以得到很好地保证。
2、珀丽康细包培养基与其他众多培养基相比,可操作的空间更大,更清晰。因此珀丽康细包培养基比较好用。
普通琼脂培养基的配制步骤?
培养基的配制:
1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3、调PH:用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。
4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。
5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,最多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度。
固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。
6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8、摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
9、贮存:培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。